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定量方法： 一般有重量法、容量法、螢光法、比色法等。以比色法應(yīng)用最廣泛。主要原理是利用羥基蒽醌衍生物與堿液生成紅色進(jìn)行比色。且因游離的羥基蒽醌類一般生物活性較其甙類小、故要測定結(jié)合蒽醌的含量。茲簡介比色法如下：
a)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備： 精密稱取50mg左右的1，8一二羥基蒽醌，于250ml容量并中用乙醚溶解并稀釋至刻度。精密量取上述標(biāo)準(zhǔn)液0.50、1.00、2.00、3.00、 4.00、5.00m1，分別放人25ml容量瓶中，在水溶上蒸去乙醚，加5%氫氧化鈉及2%氫氧化銨混合堿液至刻度，搖勻，30分鐘后比色，以試劑為空白對照，繪出光密度——濃度的曲線。
b)測定方法：
(1)游離蒽醌的測定： 藥材粉末(40目)0.1～29，在索氏提取器中以氯仿提取至無色，氯仿液以5%氫氧化鈉及2%氫氧化銨混合堿液萃取至無色。堿液用少量氯仿洗滌，過濾，沸水浴中加熱4分鐘，冷至室溫，調(diào)整至一定體積，30分鐘后同上法比色，由標(biāo)準(zhǔn)曲線計算含量。
(2)結(jié)合蒽醌的測定： 藥材粉末(40目)0.1～1g于三角燒瓶中加30m1 5N硫酸液回流水解2小時，稍冷后加30ml氯仿繼續(xù)回流1小時，用吸管吸出氯仿液，加入20ml氯仿繼續(xù)回流1小時，吸出氯仿液后再加10ml氯仿，重 復(fù)操作至提取液無色。合并氯仿液，用少量蒸餾水洗滌，用同上混合堿液同法進(jìn)行比色測定，測得之總蒽醌含量減去游離蒽醌含量，即得結(jié)合蒽醌含量。
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